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细胞复苏状态不佳,尊龙凯时如何调整?

发布时间:2025-02-14   信息来源:尊龙凯时官方编辑

细胞复苏后状态不佳该如何调整?本文将探讨细胞复苏后状态差的原因及对应解决方法,并根据不同情况提供及时的调整建议。

细胞复苏状态不佳,尊龙凯时如何调整?

细胞冻存不当

在某些情况下,细胞的冻存过程可能不当,导致复苏后状态不良。解决方法是尝试调整细胞状态,比如增加血清比例,并在后续传代中继续调整。

自行制备的冻存细胞无活性

如果自行制备的冻存细胞活性不足,建议使用传代次数少且处于对数期的细胞进行冻存。此外,提高冻存密度也有助于提升复苏存活率,推荐的冻存细度为100~300万细胞/mL。

细胞复苏方法不当

在细胞复苏过程中,讲究“快融”,越快融化,细胞所受损伤越小。确保冷冻细胞解冻迅速,并在接种前使用预热的生长培养基缓慢稀释细胞。

复苏培养基使用不当

为确保培养基在使用前已被预热,并尽快移除含有冷冻保护剂的培养基,以防止细胞活力下降。

处理细胞时的动作不够轻柔

冻存和复苏过程对大多数细胞都有不利影响,操作时应避免通过涡旋振荡或用力敲打培养瓶的方法使细胞脱落(对培养昆虫细胞则例外),也应避免高速离心。

细胞稀释过度

过度稀释会影响细胞的复苏效果,建议将解冻后的细胞以高密度接种,从而改善复苏效果。

冻存液中保护剂储存不当

如果冻存保护剂在储存过程中未避光,将可能转变为对细胞有毒的物质。此时建议重新获取一份冻存保护剂,进行再次冻存。

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