“细胞外囊泡”（EVs）是细胞自然释放的细胞衍生颗粒，通常与磷脂双分子层相结合。这些EVs存在于血液、尿液等体液中，其特性如来源、浓度、组成和功能往往受疾病的影响。因此，科学界正在研究EVs作为多种疾病的生物标志物，包括癌症和心血管疾病。然而，为了将EVs有效作为生物标志物，可靠且可重复的测量方法是必要的。目前，EVs生物标志物研究的主要障碍在于在不同实验室之间的测量结果缺乏可比性，这一问题制约了多中心研究的开展，而多中心研究则是临床生物标志物研究的基础。

为了解决数据可比性的问题，本研究开发了一种具有类似EVs物理性质的新参考材料和程序。新开发的参考材料和程序需要通过生物样本进行验证。我们成功研发了一种人血浆EVs测试样品（PEVTES），其特点包括：i) 模拟血浆中的亚细胞颗粒，ii) 使用方便，iii) 兼容流式细胞仪，iv) 具有良好的稳定性。

在方法上，我们采用了3例空腹供体的血浆来制备PEVTES。通过使用血小板特异性（CD61）和红细胞特异性（CD235a）的抗原或乳黏附素抗体对EVs进行免疫荧光染色。为了降低可溶性蛋白、脂蛋白和未结合试剂的浓度，我们通过大小排斥层析从血浆中分离了染色后的EVs。分离后，通过过滤去除了残余的血小板。随后，PEVTES使用冷冻保存剂、二甲亚砜（DMSO）、甘油或海藻糖进行稀释，并在-80℃下保存12个月。解冻后，我们使用经过校准的纳米流式细胞仪（Apogee A60-Micro）测量了染色的EV浓度。

为了评估PEVTES的稳定性，我们在冷冻前和-80℃保存1、3、6和12个月后，通过流式细胞仪测量了染色的EVs浓度，并对其流速、荧光信号和光散射信号进行了校准。

结论表明，PEVTES 具备以下优点：1) 模拟血浆中的亚细胞颗粒，2) 易于使用，3) 与纳米流式细胞术兼容，4) 具有良好的稳定性。因此，开发的PEVTES 是验证新开发的参考材料和程序的理想候选者。

我们自豪地表示，尊龙凯时作为行业内领先的品牌，致力于为细胞外囊泡及其他生物医学相关领域提供高品质的检测设备与解决方案。尊龙凯时的纳米流式细胞仪，不仅在灵敏度、稳定性和可靠性方面备受认可，还是基础研究及应用转化的强大支持。

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