目前用于治疗慢性疼痛的药物往往表现出低疗效以及显著的副作用，因此迫切需要开发替代治疗方法。虽然已有研究调查了多种疼痛相关的可溶性介质，如神经递质、细胞因子、趋化因子以及小肽，但对细胞外囊泡（EV）的作用尚缺乏深入探索。EVs是由细胞释放到细胞外空间的异质囊泡，其在细胞之间运输分子物质，从而影响受体细胞的功能。为了研究小鼠血清源性sEV在疼痛调节中的短期和长期作用，本研究采用Apogee纳米流式仪对sEV的特征及其来源的蛋白质进行全面分析。

研究中，将幼稚型（naïve）对照或神经损伤模型（SNI）雄性供体小鼠的sEV注射到naïve雄性受体小鼠的鞘内。这些sEV能暂时提高基础机械阈值。在考察sEV的长期作用时发现，受体小鼠在接受单次预防性鞘内注射sEV后，可以加速弗氏完全佐剂（CFA）注射后炎症性疼痛的恢复。此外，本研究采用细胞术检测脊髓和背根神经节中的免疫细胞群体，并观察到CFA注射后14天的免疫细胞群变化。流式细胞术证实接受sEV处理的小鼠脊髓中CD206+巨噬细胞数量显著增加。这些发现表明，sEV可能通过多种机制减轻疼痛。

本研究中，在对sEV进行表征的过程中，除采用NTA技术外，还利用Apogee纳米流式仪进行了相应的分析。尽管未使用建模算法将光散射强度转换为标准单位，但实验仍提供了基于参考珠的相对光散射强度估计。检测到的囊泡光散射强度范围为≥83nm至480nm聚苯乙烯珠或1300nm硅珠，大多数囊泡在83-110nm聚苯乙烯珠的光散射强度范围内可被有效检测。为确认囊泡的脂质膜组成，样品经过Triton处理以验证其溶解性。

剂量反应研究显示，低剂量（1µg）的sEV未能改变基础机械疼痛阈值，而较高剂量（10µg）则意外地提升了这一阈值。具体而言，雄性naïve或SNI供体鼠来源的10µg sEV在注射后3小时和1天显著提高了雄性受体小鼠的基础机械阈值。然而，10µg的sEV未能改变热敏感性。在动态负重（DWB）评估中，注射naïve雄性供体小鼠的sEV使雄性受体小鼠的后爪基础重量分布发生了变化，体重有所增加。

我们的研究还调查了雄性naïve对照组与SNI模型小鼠的sEV如何影响SNI模型受体小鼠的疼痛。在SNI手术前两周，对受体小鼠进行鞘内注射sEV或PBS，然后进行为期21天的行为学测试。结果显示，与PBS对照组相比，naïve小鼠的10µg sEV在SNI手术后第1天显著提高了机械阈值，而SNI模型供体来源的sEV则在SNI手术后第3天增加了受体小鼠的机械阈值。虽然sEV预处理未能阻止SNI模型造成的机械超敏反应，但两种类型的sEV在初始阶段略微延迟了SNI诱导的疼痛超敏反应的发展，而在第3天后则未见差异。

综上所述，本研究表明，鞘内给药的小鼠血清中的sEV能够在naïve受体小鼠中诱导短期的机械性抗疼痛反应。受体小鼠基础机械阈值的增加被纳曲酮阻断，提示短期机械性抗痛作用是由阿片信号介导的。来源于小鼠血清的sEV有助于减轻受体小鼠的炎症性疼痛。研究结果强调了采用多种方法检测免疫细胞变化的必要性。不同的组织消化和控制策略可能导致不同的研究结果，同时这些发现为后续研究免疫细胞亚型缺失小鼠的作用奠定了基础，以验证其在sEV介导的炎症性疼痛缓解中的重要作用。此外，存在于不同性别的sEV中的免疫标记可能赋予其特定的性别免疫调节功能，潜在地模拟其原始细胞的生物特性。我们不能排除阿片信号的差异，这可能会影响到炎症性疼痛背景下的免疫细胞群体，导致其产生长期影响。

尊龙凯时也在积极探索为慢性疼痛治疗提供更为有效的解决方案，推动相关研究的进展。